蜜蜂真菌病害病原的鉴定
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蜜蜂真菌病害病原的鉴定通常靠病原形态的观察、如菌丝、无性及有性步骤、子实体的形状、大小、结构、颜色等。可以先用放大镜观察其病蜂(或幼虫)是否有菌体,然后进行制片。制片时先在载玻片上滴一滴蒸馏水,以解别针取菌体于水中,并轻轻地拨并散布,然后轻轻地盖下盖玻片,置显微镜下检查。
显微镜检查观察可以达到如下几个目的:初步确定病原菌与病害的关系,了解病原菌寄生虫体和受害细胞组织的变化;可以鉴定一种病原菌在蜂群内寄生蜜蜂所表现的症状,可以明确该病原菌形态及在分类上的地位。
如果由外地寄来的标本病组织较干脆,需要连同病组织一起挑起检查时,可在病组织上加1滴5%苛性钠(NaOH)溶液进行软化,然后再用解剖针挑起后再制片检查。
若没有见到菌体的标本,可先用0.1%升汞水进行表面消毒、然后用灭菌水洗涤两次、置于保湿培养皿中,放2~3层湿的滤纸(或脱脂棉)加水保温,将标本置于滤纸上,并加盖,待菌体产生后镜检。如必要时还需进行人工诱发试验,进行分离,培养与接种。
进行人工诱发试验时,先将病标本进行表面消毒,通常抽取病蜂组织少许,放入普通培养基(马铃薯、葡萄糖、琼脂制成的培养基)中培养,将分离产生的菌体接种到同品种的蜂群,观察是否发生相同的病害症状。
通过人工诱发试验确定病原菌时,必须根据典型标本记载其症状特点,然后进行分离、培养。将分离培养所得的真菌或细菌进行蜂群接种诱发病害。接种后经常观察并记载被接种蜂群的发病个体所表现的症状变化,只有在被接种的蜂群里发病个体所表现的症状与原来的典型标本一样,同时再从被接种后发病的个体组织上分离得到接种时所用的同种的真菌或细菌时,才能证实它们是真正的病原菌。
以上是鉴定病原菌,特别是诊断少见或新的病害所必须采取的步骤。这些步骤也运用于诊断病毒等其他病害,只是在进行人工诱发时,证实病毒病害(有传染性)及其传染途径后,进行接种,当蜜蜂发病后,再从这个病蜂(或病虫)用同样的方法进行接种,得到同样的效果后,才可证实它是这种病原微生物。
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本文来源:39蜂疗网 ( 编辑:苍冥)
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