蜜蜂生化指标测定

2024年07月01日已有人阅读病友分享我想学蜂疗

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由于苹果酸脱氢酶同工酶在西方蜜蜂中是一个多态性酶，不受性别、发育和级型分化的影响，是蜜蜂当中研究得最多的一种同工酶。李举怀、李绍文(1990)通过聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF-PAGE)技术在pH3.5—10．1范围内把意蜂MDH划分为3个区带MDH I、MDH II和MDH III ，MDH I位于pH5．1—5．6范围内，MDH II在pH6．5—7．5之间，MDH III在pH9．6左右，确定了MDH II为—个位点上的3个等位基因编码的多态性酶。

在许多报道中部发现西方蜜蜂各亚种在MDH II位点上存在不同频率分布的3个等位基因(李举怀等，1996)。使用LKB等电聚焦电泳系统，用分辨率较高的Ampholine(pH6．0—8．0)能够很好地区分出该区的6种电源表型。

在电泳图谱上，MDH II在各级型和各发育阶段的个体中都呈现多态现象，它是由a、b、c、三个等位基因编码的等位基因酶，这三个等位基因分别位于PH6．6、PH7．1、pH7．5左右。对蜜蜂苹果酸脱氢酶二区(MDH II)基因、基因频率、基因型、基因型频率的研究，为西方蜜蜂的蜂种鉴定、遗传变异、系统发生和亲缘关系提供许多有价值的资料。测定蜜蜂的MDH II酶谱已是一项较成熟的实验技术，具体方法如下：

(一)样品处理每群蜂剪下35个试飞前幼龄工蜂头部，—20℃保存。任取30个用于实验。每个工蜂头置于0．5m1Eppendorf管中，加l00uL提取液，用玻棒研磨1min，自然沉淀，取上清液用于实验。

(二)MDH II基因型的测定采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF—PAGH)法，先后通过模具准备，凝胶配制，灌胶、铺胶片、加电极条和加样纸、加样、电泳、取胶染色、烘干等步骤。